TMB One Solution (HRP-based ELISA, Super-sensitivity)

單組分TMB顯色液（ELISA，HRP顯色用，超靈敏度）

產(chǎn)品信息

【溫馨提示j】：見(jiàn)我司（懋康生物）整理的單組份TMB顯色液產(chǎn)品專題。

【溫馨提示k】：我司提供即用型的單組分TMB顯色液，產(chǎn)品性能非常穩(wěn)定，且使用非?？旖荩梢怨?yīng)大貨。選購(gòu)指南如下：

背景描述

酶聯(lián)免疫分析技術(shù)（ELISA）廣泛用于抗原、半抗原或抗體的定量或定性分析，辣根過(guò)氧化物酶（HRP）及其偶聯(lián)物是ELISA技術(shù)常用的一種酶，能催化底物如3,3'5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）發(fā)生顯色反應(yīng)，從而進(jìn)行定量或定性分析。由于TMB比其他顯色底物具更高的靈敏度且無(wú)致癌性被廣泛使用，TMB主要用于ELISA，免疫斑點(diǎn)雜交或免疫組化等實(shí)驗(yàn)，也有報(bào)道將其用于氯的檢測(cè)分析。

通常TMB顯色試劑由多個(gè)組分構(gòu)成，必須在使用前進(jìn)行配制，并且容易產(chǎn)生沉淀，使用相對(duì)不便且容易導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不穩(wěn)定。本品采用全新的TMB顯色技術(shù)，將所有相關(guān)試劑全部配在一個(gè)溶液，即僅由單一溶液組成，不僅簡(jiǎn)化了操作步驟，而且使檢測(cè)結(jié)果更加穩(wěn)定可靠。

本系列產(chǎn)品專門(mén)為ELISA實(shí)驗(yàn)而設(shè)計(jì)。檢測(cè)原理在于HRP或其他適當(dāng)過(guò)氧化物酶能催化生成可溶的藍(lán)色產(chǎn)物，此時(shí)通?？稍?70nm測(cè)定吸光度。當(dāng)顯色反應(yīng)被酸性溶液（如0.5-2M H2SO4，0.5M HCl，1M H3PO4）終止后，產(chǎn)物由藍(lán)色轉(zhuǎn)為黃色，此時(shí)可在450nm測(cè)定吸光度。

產(chǎn)品描述

我司提供三款ELISA專用的單組分TMB顯色液（HRP顯色用），分別是：標(biāo)準(zhǔn)級(jí)（貨號(hào)：MM2001）、高靈敏（MM2012）、超靈敏（MM2013），從反應(yīng)速率和反應(yīng)靈敏度上來(lái)比較，依次遞增~15%。其中，標(biāo)準(zhǔn)級(jí)（貨號(hào)：MM2001）顯色敏感度高，線性濃度范圍更寬，極其適合定量ELISA。超靈敏（MM2013）反應(yīng)速率和反應(yīng)靈敏度最高，極其適合定性ELISA。

本系列產(chǎn)品用于ELISA檢測(cè)，每個(gè)樣品通常使用0.1ml顯色液，則100ml本品約檢測(cè)1000個(gè)樣品，500ml本品約檢測(cè)5000個(gè)樣品。

保存與運(yùn)輸方法

保存：2-8℃避光保存，2年有效。

運(yùn)輸：冰袋運(yùn)輸。

注意事項(xiàng)

1） 本品含TMB和H2O2，對(duì)人體有刺激性，請(qǐng)注意防護(hù)。

2） 如發(fā)現(xiàn)本品出現(xiàn)渾濁或顏色變?yōu)樗{(lán)色，請(qǐng)停止使用。

3） 本系列產(chǎn)品（三款）在應(yīng)用上各有千秋，無(wú)絕對(duì)的應(yīng)用傾向，主要還是根據(jù)自身的實(shí)驗(yàn)需求來(lái)選擇。

4） 本系列產(chǎn)品（三款）都可大量供貨，歡迎咨詢。

5） 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用方法（ELISA，96孔板）

1） 使用之前，取出適量單組份TMB顯色液，使其回到室溫再開(kāi)始使用；

2） 參考ELISA檢測(cè)試劑盒的實(shí)驗(yàn)步驟，當(dāng)與HRP標(biāo)記抗體孵育一段時(shí)間后，用適當(dāng)洗滌液洗滌3-5次，每次3-5min。

3） 洗滌完畢后，去除洗滌液，加入100μl單組份TMB顯色液。

4） 室溫避光孵育5-30min或更長(zhǎng)時(shí)間（可長(zhǎng)達(dá)24h），直至顯色到預(yù)期深淺。【注意】：建議根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇試劑用量、顯色時(shí)間和反應(yīng)溫度。

5） 直接在370nm測(cè)定吸光度?；蛘呒尤?00μl 0.5-2M H2SO4 或商業(yè)化的TMB終止液（450nm）（貨號(hào)：MM2007）終止反應(yīng)，隨后在450nm測(cè)定吸光度

常用問(wèn)題

1.背景顯色太深

1）如果背景（沒(méi)有樣品的對(duì)照）顯色太深，一方面需考慮使用適當(dāng)?shù)姆忾]液進(jìn)行封閉，如商業(yè)化封閉液或者和一抗相同來(lái)源的血清（10%）進(jìn)行封閉。另一方面，使用經(jīng)過(guò)適當(dāng)吸附的二抗，以減小二抗的非特異性吸附。

2）可以考慮縮短顯色時(shí)間，或降低二抗?jié)舛取Ａ硗?，選擇適當(dāng)強(qiáng)度的洗滌液，或延長(zhǎng)洗滌時(shí)間也會(huì)有所幫助。

2.沒(méi)有顯色或顯色太弱

1）適當(dāng)提高一抗或二抗的濃度。檢測(cè)二抗效果，滴一滴稀釋二抗在離心管內(nèi)，檢測(cè)二抗是否被正常顯色。

2）可以考慮使用更加靈敏的放大檢測(cè)體系，例如生物su檢測(cè)體系。

3）可以適當(dāng)延長(zhǎng)顯色時(shí)間。

4）如果上述改進(jìn)不能獲得預(yù)期效果，可以考慮更換效果更好的一抗或ELISA試劑盒。

相關(guān)產(chǎn)品

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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